小檗碱(Berberine, BBR)通过减少ROS的生成、增强抗氧化酶活性、清除氧自由基、减轻过氧化反应等途径来实现抗氧化作用。因此本研究拟利用BBR的抗氧化作用缓解小鼠肾纤维化(renal fibrosis, RF)损伤。通过观察小鼠肾脏大体标本,评价黄连素对RF小鼠肾脏纤维化的缓解能力;通过检测小鼠血尿素氮、血肌酐水平,评价BBR对RF小鼠肾脏功能的恢复作用;通过观察左侧肾HE切片,评价BBR对RF小鼠肾脏炎细胞的浸润及组织结构恢复情况;通过流式细胞仪检测肾脏匀浆中ROS及SOD水平,评估BBR对RF小鼠的抗氧化应激能力;通过免疫组织化学染色检测肾脏组织中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白表达,评估BBR对RF小鼠的炎症恢复作用;通过Western Blot技术检测肾脏中NF-κBp65及p-NF-κBp65蛋白水平,评估BBR对NF-κB炎症信号通路的抑制作用;通过免疫组织化学染色及Western Blot技术检测肾脏组织中α-SMA、E-cadherin的蛋白表达及通过Masson染色检测肾脏组织中胶原成分,评估BBR对RF小鼠肾脏纤维化的影响;通过Western Blot技术检测肾脏中转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)蛋白水平,评估BBR对TGF-β1/CTGF促纤维化信号通路的抑制作用。
小檗碱通过减少ROS生成,抑制NF-κB炎症信号通路,缓解UUO导致的小鼠肾脏炎症,进而抑制TGF-β1/CTGF促纤维化信号通路,缓解小鼠肾脏纤维化,恢复肾功能。本课题旨在阐明小檗碱有效抑制肾脏纤维化的分子机制,为防治纤维化相关疾病提供新策略和新靶点,可望为开发临床用药奠定理论基础并提供重要的应用价值。